Membranas amnióticas y su aplicación en el tratamiento de quemaduras: una revisión sistemática exploratoria

Las quemaduras son un problema de interés en salud pública ya que generan un alto índice de morbimortalidad a nivel mundial, las quemaduras térmicas son las más prevalentes y pueden alterar la integridad anatómica, funcional y estética de la piel, aspectos fundamentales para la autoestima del paciente y su capacidad para reintegrarse a la sociedad. Al revisar la literatura sobre el tratamiento de estas afecciones encontramos diversos tratamientos, entre ellos el uso de membrana amniótica humana, la cual ha tenido un impacto importante en el manejo de quemaduras al funcionar como andamio biológico con cualidades regenerativas y antiinflamatorias. El presente artículo tiene como objetivo sintetizar la información actual que describe las aplicaciones de membranas amnióticas humanas en quemaduras, realizamos una revisión exploratoria sistemática de la literatura desde 2010 hasta 2021.

Burns are a problem of interest in public health since they generate a high rate of morbidity and mortality worldwide, thermal burns are the most prevalent and can alter the anatomical, functional and aesthetic integrity of the skin, fundamental aspects for the patient's self-esteem and their ability to reintegrate into society. At review literature about the treatment of these conditions, we find various treatments, including the use of human amniotic membrane, which has had a significant impact on burn management by functioning as a biological scaffold with regenerative and anti-inflammatory qualities. The present article aims to synthesize the current information that describes the applications of human amniotic membranes in burns. We carry out a systematic exploratory review of the literature from 2010 to 2021.

Uso de la membrana amniótica como material de apósito en paciente con fascitis necrotizante: A propósito de un caso

Introducción: La fascitis necrotizante es una infección grave que involucra la piel, el tejido celular subcutáneo y las fascias superficiales-profundas, progresa muy rápidamente y si no se trata a tiempo puede causar la muerte. Reporte de caso: Presentamos el caso de una paciente adulta con antecedentes de anemia, a quien se le diagnosticó fascitis necrosante de origen odontogénico, por lo que fue intervenida quirúrgicamente y se realizó un drenaje intraoral y extraoral más escarectomía. Además, se le administró tratamiento farmacológico (antibióticos intravenosos) y se colocó una membrana amniótica como material de apósito para reconstruir la superficie hemorrágica dejada por la fascitis necrotizante. Conclusiones: La membrana amniótica como material de apósito presentó resultados favorables en la paciente al obtenerse una rápida regeneración de la secuela producida por la fascitis necrotizante.

Introduction: Necrotizing fasciitis is a serious infection that involves the skin, the subcutaneous tissue, and the superficial-deep fascia, it progresses very quickly and if not treated in time it can cause death. Report case: We present the case of an adult patient with a history of anemia, who was diagnosed with odontogenic necrotizing fasciitis, for which she underwent surgery and underwent intraoral and extraoral drainage plus escharectomy. In addition, pharmacological treatment (intravenous antibiotics) was administered, and an amniotic membrane was placed as a dressing material to reconstruct the hemorrhagic surface left by the necrotizing fasciitis. Conclusions: The amniotic membrane as a dressing material presented favorable results in the patient, obtaining a rapid regeneration of the sequel produced by necrotizing fasciitis.

Uso de membrana amniótica como cobertura temporal en pacientes pediátricos con quemaduras / Use of amniotic membrane as temporary coverage in pediatric patients with burn

Introducción: Los niños con quemaduras tienen un manejo complejo por lo cual el uso de la membrana amniótica como una cobertura temporal es un método válido para su implementación. Objetivos: Demostrar el uso de la membrana amniótica como cobertura temporal en pacientes pediátricos con quemaduras de segundo grado superficiales y profundas internados en el Centro Nacional de Quemaduras y Cirugías Reconstructivas (CENQUER), en julio y diciembre del 2021. Materiales y métodos: Estudio descriptivo de tipo retrospectivo mediante la revisión de casos clínicos-quirúrgicos de los pacientes pediátricos que ingresaron por diagnóstico de quemadura de segundo grado superficial y profundo en el CENQUER, durante el período comprendido entre julio y diciembre del 2021, donde se aplicó́ membrana amniótica humana. Resultados: Población de 14 pacientes, 11 provenían del departamento central y 3 del interior del país, con un promedio de 13% (R: 3%-25,5%) de superficie corporal quemada (SCQ) todos con quemaduras en promedio 7% tipo AB y 6% tipo ABB, 7 ingresaron con una gravedad moderada, 4 graves y 3 leves; 7 del sexo masculino y 7 del femenino , con un rango de edades entre 8 meses y 11 años cuya media fue de 4 años y una mediana de 7 años, con respecto al peso un promedio de 18 kg al ingreso % (R: 9-35 kg), las causas de las lesiones fueron 12 por escaldadura por agua caliente (85 %) y 2 por escaldadura con comida; 10 pacientes presentaron internación en sala y en la Unidad de terapia intensiva Pediátrica (UTIP) 4 pacientes, el promedio de tiempo transcurrido desde la quemadura a la consulta fueron de 7 hs (R: 1-48 hs), las regiones anatómicas que se cubrieron fueron: 4 pacientes en miembros superiores y tórax anterior (28 %), 2 exclusivamente en tórax anterior (16 %), 4 solo en miembros superiores (28 %), 4 en miembros inferiores (28 %), a los que se les colocó amnios por única ocasión en 10 pacientes a las 24 hs de la internación y en 4 pacientes a las 48 hs de internación, se utilizó antobioticoterapia parenteral en 3 pacientes y 11 pacientes no necesitaron antibioticoterapia parenteral, no se presentaron complicaciones en ninguno de los pacientes y tuvieron un promedio de internación de 8 días (R: 3- 16 días). Conclusión: El uso de membrana amniótica humana en pacientes quemados son favorables para los pacientes pediátricos; como demuestra en el estudio el menor uso de antibioticoterapia parenteral por la cobertura rápida de las heridas causadas por las quemaduras y el menor número de días de internación.

Introduction: Children with burns have a complex management for which the use of the amniotic membrane as a temporary cover is a valid method for its implementation. Objectives: Demonstrate the use of the amniotic membrane as temporary coverage in pediatric patients with superficial and deep second-degree burns admitted to the National Center for Burns and Reconstructive Surgery (CENQUER), in July and December 2021. Materials and methods: Descriptive retrospective study through the review of clinical-surgical cases of pediatric patients who were admitted due to a diagnosis of superficial and deep second-degree burns in the CENQUER, during the period between July and December 2021, where human amniotic membrane was applied. Results: Population of 14 patients, 11 came from the central department and 3 from the interior of the country, with an average of 13% (R: 3%-25.5%) of burned body surface area (SCQ), all with average 7% AB type burns. and 6% type ABB, 7 admitted with moderate severity, 4 severe and 3 mild; 7 males and 7 females, with an age range between 8 months and 11 years, whose average was 4 years and a median of 7 years, with respect to weight an average of 18 kg at admission % (R: 9- 35 kg), the causes of the injuries were 12 due to scalding due to hot water (85%) and 2 due to scalding with food; 10 patients were hospitalized in the ward and in the Pediatric Intensive Care Unit (PICU) 4 patients, the average time elapsed from the burn to the consultation was 7 hours (R: 1-48 hours), the anatomical regions that were covered were: 4 patients in the upper limbs and anterior thorax (28%), 2 exclusively in the anterior thorax (16%), 4 only in the upper limbs (28%), 4 in the lower limbs (28%), who received amnios for a single occasion in 10 patients at 24 hours of hospitalization and in 4 patients at 48 hours of hospitalization, parenteral antibiotic therapy was used in 3 patients and 11 patients did not need parenteral antibiotic therapy, there were no complications in any of the patients and they had an average hospital stay of 8 days (R: 3-16 days). Conclusion: The use of human amniotic membrane in burn patients is favorable for pediatric patients; As shown in the study, the lower use of parenteral antibiotic therapy due to the rapid coverage of wounds caused by burns and the lower number of days of hospitalization.

Uso de membrana amniótica e injerto meek en un niño con quemaduras severas / Use of amniotic membrane and meek graft in a child with severe burns

El desbridamiento temprano seguido de cobertura con piel autóloga ha demostrado reducir la mortalidad en los pacientes quemados. En pacientes con quemaduras extensas, la carencia de zonas de piel donante es un factor limitante a la hora del tratamiento. El hecho de que no se pueda lograr un desbridamiento y cobertura completos en un primer tiempo favorece la infección de la quemadura y la septicemia, pudiendo tener consecuencias nefastas. Por tanto, es necesario disponer de otras opciones distintas a los injertos mallados de piel parcial, el tratamiento estándar hoy día. Presentamos el caso clínico de un niño con quemaduras severas y describimos los resultados obtenidos con el uso de la membrana amniótica como cobertura temporal y al injerto mallado tipo MEEK.

Early debridement followed by coverage with autologous skin has been shown to reduce mortality in burn patients. In patients with extensive burns, the lack of areas of donor skin is a limiting factor at the time of treatment. The fact that a complete debridement and coverage cannot be achieved in the first stage favors the infection of the burn and septicemia, which can have dire consequences. Therefore, it is necessary to have other options than partial skin mesh grafts, the standard treatment today. We present the clinical case of a child with severe burns and describe the results obtained with the use of the amniotic membrane as temporary covering and the MEEK-type mesh graft.

Utilidad de la membrana amniótica en el proceso de cicatrización / Usefulness of the amniotic membrane in the scaring process

Se describen los casos clínicos de dos pacientes ingresados en el Hospital Provincial Docente Clinicoquirúrgico Saturnino Lora de Santiago de Cuba: un anciano que recibió una revascularización coronaria en el Servicio de Cirugía Cardiovascular y presentó infección del sitio quirúrgico, así como rechazo al material de sutura; y una adulta joven asistida en la Unidad de Cuidados Intensivos por una endocarditis bacteriana, a la que, después de dos meses de estadía hospitalaria, se le desarrolló una úlcera por presión de grado III en la región sacra, con 8 cm de diámetro y exposición ósea. En estos pacientes se habían aplicado todos los protocolos terapéuticos establecidos según el tipo de afección, pero al no sanar las lesiones, se decidió aplicar apósitos de membrana amniótica, con lo cual la evolución fue favorable y se logró la cicatrización de las heridas.

The case reports of two patients admitted to Saturnino Lora Teaching Clinical Surgical Provincial Hospital in Santiago de Cuba are described: an old man that received a coronary revascularization in the Cardiovascular Surgery Service and presented infection of the surgical site, as well as suture material rejection; and a young adult woman assisted in the Intensive Cares Unit due to a bacterial endocarditis, who after two months of hospitalization developed a grade III pressure ulcer in the sacral region, with a diameter of 8 cm and bony exposure. In these patients all the established therapeutic protocols had been implemented according to the type of disorder, but if there is no healing of the lesions, it was decided to apply amniotic membrane dressings, with which there was a favorable clinical course and the scaring of the wounds was achieved.

Comparação dos meios de preparação e preservação de membrana amniótica humana para uso no tratamento de doenças da superfície ocular / Comparison of the preparation and preservation techniques of amniotic membrane used in the treatment of ocular surface diseases

Resumo Atualmente a membra amniótica (MA) tem obtido importância devido à comprovada capacidade de reduzir inflamação, auxiliar a cicatrização e epitelização, possuindo propriedades antimicrobianas e antivirais, além de baixa imunogenicidade. As indicações de seu uso na oftalmologia têm aumentado muito nas duas últimas décadas. Objetivo: Descrever a estrutura básica e as propriedades biológicas da MA em relação aos componentes da sua matriz extracelular e fatores de crescimento, as consequências de diferentes técnicas empregadas na sua preservação e esterilização, métodos para remoção do epitélio e a comparação dos custos dos diferentes meios de conservação atualmente empregados. Métodos: Pesquisa nas bases de dados do Portal da Biblioteca Virtual em Saúde (BVS), Pubmed, Cochrane, Scielo e Lilacs com as palavras-chave: membrana amniótica, transplante, reconstrução da córnea, doenças da conjuntiva. Resultados: A literatura é vasta na descrição dos efeitos de diversos agentes e técnicas na preparação da MA, dentre elas sua preservação, esterilização e desepitelização. A membrana desnuda tem sido a escolha para a reconstrução da superfície ocular, pois facilita a cicatrização. Em relação aos agentes conservantes, o glicerol é o meio mais utilizado mundialmente pelo baixo custo e facilidade de manuseio. Conclusão: A comparação das diversas técnicas nos guia na elaboração de protocolos de preparo da MA para uso oftalmológico. A membrana desnuda facilita a cicatrização em relação a com células epiteliais. O glicerol é o meio de conservação mais utilizado pelo baixo custo e facilidade de manuseio.

Abstract Currently, the amniotic membrane (AM) has obtained importance due to its ability to reduce inflammation, helping in the healing and epithelialization processes, having antimicrobial and antiviral properties and low immunogenicity. Its indications in ophthalmology have increased considerably in the past two decades. Objective: To describe the basic structure and biological properties of the AM, the components of the extracellular matrix and growth factors, the consequences of different techniques used in its preservation, and sterilization methods for the epithelium removal. To compare the costs of the different preservation solutions currently employed. Study design: literature review. Methods: Research in BVS databases, PubMed, Cochrane, Scielo and Lilacs with keywords: amniotic membrane transplantation, corneal reconstruction, conjunctival diseases. Results: The literature is vast in describing the effects of different agents and techniques used in the preparation of MA, including its preservation, sterilization and desepithelization. The naked membrane is the choice to reconstruct the ocular surface, as it facilitates the healing course. Regarding the preservatives, glycerol is the most used worldwide due its low cost and easy handling. Conclusion: Comparing different techniques guides us in developing a MA preparation protocol for ophthalmic use. The naked membrane facilitates the healing process compared with the presence of epithelial cells. The glycerol is the most used preservation method because of its low cost and easy handling.

Amniotic membrane as a biological scaffold for dental pulp stem cell transplantation in ocular surface reconstruction / Membrana amniótica como substrato biológico para o transplante de células-tronco da polpa do dente de leite na reconstrução da superfície ocular

ABSTRACT Purpose: To evaluate the ability of human immature dental pulp stem cells, which are mesenchymal stem cells of neural crest origin, to differentiate into the corneal epithelium for purposes of corneal transplantation and tissue engineering when cultured on de-epithelized amniotic membranes. Methods: We compared the immunophenotypes (ABCG2, K3/12, and vimentin) of cells grown on amniotic membranes or plastic surfaces under serum-free conditions or in culture media containing serum or serum replacement components. Results: Immature dental pulp stem cells grown on amniotic membranes under basal conditions are able to maintain their undifferentiated state. Our data also suggest that the culture medium used in the present work can modulate the expression of immature dental pulp stem cell markers, thus inducing epithelial differentiation of these cells in vitro. Conclusions: Our results suggest that the amniotic membrane is a good choice for the growth and transplantation of mesenchymal stem cells, particularly immature dental pulp stem cells, in clinical ocular surface reconstruction.

RESUMO Objetivos: Avaliar a capacidade das células-tronco imaturas da polpa do dente de leite que são células-tronco mesenquimais de origem da crista neural, de se diferenciarem no epitélio corneano para fins de transplante de córnea e engenharia de tecidos quando cultivadas em membrana amnióticas desepitelizadas. Métodos: Foram comparamos so imunofenótipo (ABCG2, CK3/12 e vimentina) de células cultivadas em membranas amnióticas ou em superfícies plásticas sob condições livres de soro ou em meios de cultura contendo soro ou componentes de substituição de soro. Resultados: Células-tronco imaturas da polpa do dente de leite cultivadas sobre membrana amniótica em condições basais são capazes de manter seu estado indiferenciado. Nossos dados também sugerem que o meio de cultura utilizado no presente trabalho pode modular a expressão de marcadores de células-tronco imaturas da polpa do dente de leite, induzindo a diferenciação epitelial destas células in vitro. Conclusão: Nossos resultados sugerem que a membrana amniótica é uma boa escolha para o crescimento e transplante de células-tronco mesenquimais, particularmente as células-tronco imaturas da polpa do dente de leite, na reconstrução da superfície ocular.

Implante de membrana amniótica en la corrección de úlceras corneales profundas de caninos y felinos / Amniotic membrane implant in the correction of deep corneal ulcers in canines and felines / Implante de membrana amniótica na correção de úlceras corneais profundas de caninos e felinos

Resumen Antecedentes: gran parte de los defectos del epitelio corneal, como las queratitis ulcerativas, no responden al tratamiento convencional y progresan a ulceración estromal y perforación inminente. En busca de nuevas opciones terapéuticas para corregir dichos defectos corneales, se encuentran el uso de membrana amniótica y las plastias corneales, ambos tratamientos quirúrgicos buscan una reepitelización corneal y un adecuado proceso de cicatrización cuando el tratamiento médico no ha tenido éxito. Objetivos: por medio de este trabajo se busca analizar los estudios actualizados referentes a los implantes de membrana amniótica para la resolución de úlceras corneales profundas en caninos y felinos, para poder definir los principios terapéuticos de la membrana amniótica en patologías oculares, determinar un protocolo de preparación de injertos de membrana amniótica y servir de base para estudios prácticos acerca de implantes corneales en caninos y felinos en Colombia. Conclusiones: con base en los resultados obtenidos en el proceso de revisión documental y en la experiencia quirúrgica de los autores, puede concluirse que el uso de la membrana amniótica apoya el crecimiento del epitelio de la superficie ocular y facilita la migración de las células epiteliales, proporciona una barrera a la infección, promueve la revitalización y mejora el dolor. Gracias a sus características únicas ofrece una opción importante en el tratamiento de úlceras corneales. En los últimos años su eficacia ha sido demostrada en el tratamiento de las enfermedades de la superficie ocular, y es ampliamente utilizada en este tipo de patologías.

Abstract Introduction: Most defects of the corneal epithelium, such as ulcerative keratitis, do not respond to conventional treatment and they progress to stromal ulceration and imminent perforation. Among new therapeutic options to correct these corneal defects, there is the use of amniotic membrane and corneal plasties; both surgical treatments seek a corneal reepithelialization and an adequate healing process when medical treatment has not been successful. Objectives: This work seeks to analyze updated studies concerning amniotic membrane implants for the solution of deep corneal ulcers in canines and felines, in order to define the therapeutic principles of amniotic membrane in ocular pathologies, determine a protocol for the preparation of amniotic membrane grafts, and serve as a basis for practical studies about corneal implants in canines and felines in Colombia. Conclusions: Based on the results obtained during the document review process and the surgical experience of the authors, it can be concluded that the use of amniotic membrane supports the growth of the ocular surface epithelium and facilitates the migration of epithelial cells, provides a barrier to infection, promotes revitalization, and ameliorates pain. Thanks to its unique characteristics, it is an excellent option in the treatment of corneal ulcers. In recent years, its effectiveness has been demonstrated in the treatment of ocular surface diseases, and is widely used in this type of pathologies.

Resumo Antecedentes: grande parte dos defeitos do epitélio corneano, como as queratites ulcerativas, não respondem ao tratamento convencional e progridem a ulceração estroma e perfuração iminente. Na busca de novas opções terapêuticas para corrigir estes defeitos corneais, encontram-se o uso de membrana amniótica e as reparações corneais, ambos tratamentos cirúrgicos buscam uma reepitelização da córnea e um adequado processo de cicatrização quando o tratamento médico não foi bem sucedido. Objetivos: por meio deste trabalho se busca analisar os estudos atualizados referentes aos implantes de membrana amniótica para a resolução de úlceras corneais profundas em caninos e felinos, para poder definir os princípios terapêuticos da membrana amniótica em patologias oculares, determinar um protocolo de preparação de enxertos de membrana amniótica e servir de base para estudos práticos sobre os implantes corneais em caninos e felinos na Colômbia. Conclusões: com base nos resultados obtidos no processo de revisão documental e na experiência cirúrgica dos autores, pode concluir-se que o uso da membrana amniótica apoia o crescimento do epitélio da superfície ocular e facilita a migração das células epiteliais, proporciona uma barreira à infecção, promove a revitalização e melhora a dor. Graças a suas características únicas oferece uma opção importante no tratamento de úlceras corneais. Nos últimos anos a sua eficácia tem sido demonstrada no tratamento das doenças da superfície ocular, e é amplamente utilizada neste tipo de patologias.

A randomized trial study on the effect of amniotic membrane graft on wound healing process after anal fistulotomy / Ensaio clínico randomizado sobre o efeito do enxerto de membrana amniótica sobre o processo de cicatrização após fistulotomia anal

Abstract Objective Human amniotic membrane (HAM) used as a wound coverage for more than a century. The aim of this study is to evaluate the efficacy of amniotic membrane on wound healing and reduce post-operative complication. Study design Randomized clinical trial study. Place and duration of study Surgery Department, Shahid Faghihi Hospital, Shiraz, in the period of between Sep. 2014 and Nov. 2015. Methodology 73 patients with anal fistula were divided into two groups. The patients suffered from simple perianal fistula (low type) without any past medical history. Fistulotomy were performed for all of them and in interventional group HAM were applied as biologic dressing. Their wound healing improvement was evaluated post-operative in two groups. Results From 73 patients participated in the study, 36 patients were in control group and 37 patients were in intervention group. According to the analysis of images taken from the wound, the rate of wound healing was 67.39% in intervention group and 54.51% in control group (p < 0.001). Discharge, pain, itching and stool incontinency was lower in intervention group. Analysis of pathology samples taken from the wound showed no differences between two groups. Conclusion HAM application could lead to improvement of wound healing and reduced post-operative complications. In conclusion, HAM may act as a biologic dressing in the patients with anal fistula.

Resumo Objetivo Membrana amniótica humana (MAH) tem sido usada para cobrir feridas por mais de um século. O objetivo deste estudo é avaliar a eficácia da membrana amniótica na cicatrização de feridas e reduzir complicações pós-operatórias. Desenho do estudo Ensaio clínico randomizado. Local e duração do estudo Departamento de Cirurgia, Shahid Faghihi Hospital, Shiraz, Irã, entre setembro de 2014 a novembro de 2015. Método 73 pacientes com fístula anal foram divididos em dois grupos. Os pacientes sofriam de fístula perianal simples (tipo baixo) sem histórico médico prévio. A fistulotomia foi realizada em todos eles e no grupo intervenção, MAH foi aplicada como curativo biológico. A melhora da cicatrização foi avaliada no período pós-operatório em dois grupos. Resultados De 73 pacientes que participaram do estudo, 36 pacientes eram do grupo controle e 37 pacientes do grupo intervenção. De acordo com a análise das imagens da ferida, a taxa de cicatrização foi 67,39% no grupo intervenção e 54,51% no grupo controle (p < 0,001). Secreção, dor, prurido e incontinência fecal foi menor no grupo intervenção. A análise das amostras patológicas retiradas da ferida não mostrou diferenças entre os dois grupos. Conclusão A aplicação de MAH pode levar à melhoria da cicatrização de feridas e reduzir as complicações pós-operatórias. Em conclusão, a MAH pode atuar como um curativo biológico nos pacientes com fístula anal.

Epitelização de enxertos cutâneos em feridas recentes de coelhos tratados com membrana amniótica canina e/ou laserterapia / Skin graft epithelialization in rabbit fresh wounds treated with amniotic membrane and/or laser therapy

A enxertia cutânea é uma técnica cirúrgica simples e bastante útil para o reparo de feridas, principalmente aquelas onde existe dificuldade da aplicação do fechamento primário ou de outras técnicas reconstrutivas. Entretanto, para a sobrevivência do enxerto, é necessário que o leito da ferida esteja saudável e com presença de tecido de granulação exuberante. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a aplicação da membrana amniótica e da laserterapia como potenciais estimulantes da cicatrização em enxertos aplicados em feridas sem tecido de granulação. Foram utilizados 42 coelhos, divididos em quatro grupos: grupo controle (GC), grupo membrana (GM), grupo laser (GL) e grupo membrana e laser (GML), submetidos a avaliações macro e microscópicas. Na avaliação macroscópica, foi possível notar que os pacientes dos grupos nos quais a membrana amniótica foi utilizada (GM e GML) apresentaram evidências associadas à acentuada reação inflamatória, à falha de integração do enxerto e à consequente necrose dele. Já os pacientes do GL apresentaram melhor aspecto do enxerto no último dia de avaliação. Na análise microscópica, observou-se intensa integração do enxerto à derme, reepitelização acentuada e escassas células inflamatórias no local do enxerto no GL. O contrário foi observado nos pacientes do GM e GML, nos quais aparentemente houve rejeição da membrana. A formação de colágeno não se correlacionou com outros fatores, como inflamação e necrose, em nenhum dos grupos de tratamento. Dessa forma, é possível afirmar que a laserterapia mostrou ser efetiva, contribuindo para o processo cicatricial e a integração do enxerto. Já a membrana amniótica canina não deve ser utilizada para esse fim, pois provoca intensa reação inflamatória, além de impedir a nutrição do enxerto.(AU)

Skin grafting is a simple surgical technique and useful to repair wounds, especially those where there is a difficulty to apply primary closure skin or other reconstructive techniques. However, for graft survival a healthy wound bed and the presence of an exuberant granulation tissue are necessary. This study aimed to evaluate the application of amniotic membrane and laser therapy as potential healing stimulants in grafts applied in wounds without granulation tissue. For this, we used 42 rabbits divided into four treatment groups, control group (CG), membrane group (MG), laser group (LG) and membrane and laser group (MLG), submitted to macroscopic and microscopic evaluation. The macroscopic examination showed that the patients of the groups where the amniotic membrane was used in order to stimulate re-epithelialization (MG and MLG) presented evidences associated with severe inflammatory reaction, graft integration failure and consequent necrosis. LG patients apparently had the best graph aspect in the last valuation date. Microscopic examination showed intense integration of the graft to the dermis, high re-epithelialization level, and scarce inflammatory cells in the graft site of LG patients. The opposite was observed in patients in the MG and MLG groups, where a rejection of the membrane was observed. Finally, collagen formation was not correlated with other factors such as inflammation and necrosis in any of the treatment groups. We can conclude that laser therapy was effective, contributing to the healing process and integration of the graft. Thus, canine amniotic membrane should not be used for this purpose because it causes intense inflammatory reaction besides avoiding graft nutrition.(AU)

Histopathological and immunohistochemical changes in the amniotic membrane of gestational diabetic mothers / Cambios histopatológicos e inmunohistoquímicos de la membrana amniótica de madres diabéticas gestacionales

The aim of this study is to examine the changes in the amniotic membrane diagnosed with gestational diabetes mellitus. In this study, as a control group human amnion membrane from normotensive pregnancies was collected from diabetic women at 28­35 weeks of gestation. Gestational diabetes (n= 6) and normal amnion membrane (n= 6) for a total of 12 units were received. Amniotic membrane thickness was measured (p<0.0001) and it was significantly higher in GDM groups compared to control group. The diameter of the amniotic epithelial cell nuclei was measured (p=0.0022). Gestational diabetes results show that there was weakening between amniotic epithelial cell-cell junction. This study showed that structural changes in epithelial cells of amniotic membrane were formed due to diabetes. The membrane thickness has led to structural changes in diameter and in diabetes group cause extracellular matrix to increase, thus leading to MMP-9 expression increase eventually disrupting matrix balance. In addition, with cd44 increase angiogenesis has been induced and thought to influence material pass between fetus and mother.

El objetivo de este estudio fue examinar los cambios en la membrana amniótica diagnosticada con diabetes mellitus gestacional (DMG). En este estudio, como grupo control, se recogió la membrana amniótica de embarazos normotensos de mujeres diabéticas a las 28 y 35 semanas de gestación. La muestra consistió en 6 casos con diabetes gestacional (n = 6) y 6 casos de membrana amniótica normal (n = 6), para un total de 12 casos. El espesor de la membrana amniótica se midió (p <0,0001) y fue significativamente mayor en los grupos de DMG en comparación con el grupo control. Se midió el diámetro de los núcleos de las células epiteliales amnióticas (p = 0,0022). Los resultados demostraron que en la DMG hubo debilitamiento entre la célula epitelial amniótica-célula de unión. Este estudio mostró que los cambios estructurales en las células epiteliales de la membrana amniótica se presentaron debido a la DMG. El espesor de la membrana ha dado lugar a cambios estructurales en el diámetro y en el grupo de DMG debido a un aumento de la matriz extracelular, lo que condujo al aumento de la expresión de MMP-9, eventualmente interrumpiendo el equilibrio de la matriz. Además, el aumento de cd44 indujo la angiogénesis y se cree que también influye en el material que se comparte entre el feto y la madre.

Manejo de quemadura ocular severa con implante de membrana amniótica / Severe ocular chemical injuries management with amniotic membrane implant

Objetivo: Las quemaduras oculares químicas con compromiso extenso de limbo (mayor del 50%) tienen mal pronóstico visual con manejo médico como única alternativa terapéutica; por lo que el propósito de este trabajo es evaluar el tratamiento temprano con el implante de membrana amniótica en cuanto a resultados anatómicos y funcionales en estos pacientes. Metodología: Estudio retrospectivo tipo serie de casos. Se presentan los resultados visuales en 9 ojos de 6 pacientes tratados en la Clínica de Oftalmología de Cali y el Hospital Universitario del Valle con quemadura ocular química grave a los que se les realizó implante precoz de membrana amniótica adjunto al manejo oftalmológico convencional. Resultados: Todos los pacientes tuvieron mejoría de la agudeza visual. El 87% de ellos lograron una agudeza visual mejor corregida (AVMC) de 20/30 o mejor. Ningún paciente desarrolló simbléfaron ni requirió trasplante heterólogo de córnea. Conclusiones: Los resultados presentados sugieren que el implante de membrana amniótica precoz adicional a la terapia médica, puede ser el manejo de elección en la fase aguda de quemaduras químicas extensas de superficie ocular (compromiso mayor del 50% de limbo), ya que mejora el pronóstico visual con respecto a la terapia médica como único manejo.

Purpose: Ocular chemical burns with extensive limbus involvement (greater than 50%) have poor visual prognosis with medical management as the only therapeutic alternative; So the purpose of this work is to evaluate if early treatment with amniotic membrane implant improves the anatomical and functional results in these patients. Methods: Retrospective study of a cases series. We present the visual results in 9 eyes of 6 patients treated at the Cali Ophthalmology Clinic and the Valle´s University Hospital with severe chemical ocular burns who underwent early amniotic membrane implantation added to conventional ophthalmologic management. Results: All patients had improvement of visual acuity. 87% of patients achieved a better corrected visual acuity (BCVA) of 20/30 or better. No patient developed simblefaron or required heterologous corneal transplantation. Conclusions: The results presented suggest that amniotic membrane implantation in addition to medical therapy could be the management of choice in the acute phase of extensive ocular surface chemical burns (involvement greater than 50% of limbo), since it improves the visual prognosis with respect to medical therapy as sole management.

Lamellar keratoplasty in rabbits using an allogeneic free omental graft and omentum-derived mesenchymal cells associated with the canine amniotic membrane / Ceratoplastia lamelar em coelhos usando enxerto de omento alógeno livre e células mesenquimais omentais associadas com membrana amniótica canina

ABSTRACT: The objective of this research was to evaluate the clinical and microscopic effects in rabbits of lamellar keratoplasty using allogeneic omentum associated with canine amniotic membrane (AM). Rabbits were divided into two groups: one received the allogeneic free omental graft covered with the AM (OM-graft group), while the other received the AM graft containing omental mesenchymal cells (OM-cell group). Clinical signs were evaluated on different postoperative days. After the clinical assessments, the rabbits were euthanized and their corneas were obtained for histopathology and immunohistochemistry (Ki-67, marker for proliferation). Both groups showed chemosis, blepharospasm, eye discharge, hyperemia, and corneal opacity/edema. Neovascularization was observed in the OM-cell group. Histopathological evaluation revealed epithelial islands within the stroma of OM-cell samples. Thirty days after surgery, complete corneal re-epithelialization had occurred in both groups. The OM-cell group showed more Ki-67 positive cells. The free omentum and its cells, combined with the AM, contributed to corneal repair, a process that was completed 30 days after lamellar keratoplasty.

RESUMO: Objetivou-se, com a pesquisa, avaliar os efeitos clínicos e microscópicos da associação do omento de coelho com a membrana amniótica (AM) canina, na ceratoplastia lamelar em coelhos. Dois grupos foram constituídos: um recebeu enxerto de omento alógeno livre, recoberto por AM (grupo OM- graft); o outro recebeu enxerto de AM contendo células mesenquimais derivadas do omento (grupo OM-cell). Manifestações clínicas foram avaliadas em diferentes tempos de pós-operatórios. Após as avaliações clínicas, coelhos foram submetidos à eutanásia e córneas foram colhidas para histopatologia e imunohistoquímica (Ki-67, marcador de proliferação). Relativamente às manifestações clínicas, ambos os grupos apresentaram sinais de quemose, blefarospasmo, secreção ocular, hiperemia e opacidade/edema. Neovascularização foi observada no grupo OM-cell. Avaliações à histopatologia mostraram que uma amostra de OM-cell apresentou ilhas de epitélio dentro do estroma. Aos 30 dias de pós-operatório, observou-se reepitelização corneal completa, em OM-graft e OM-cell. O grupo OM-cell apresentou mais células positivas para Ki-67. O omento livre e suas células, associados à AM, contribuíram para a reparação corneal, que se completou após 30 dias de ceratoplastia lamelar.

Trasplante de membrana amniótica para el tratamiento de queratitis ulcerativa recurrente por virus herpes simple

La queratitis por herpes simple es una de las causas más importantes de ceguera por infección corneal. El virus permanece latente en el huésped humano después de la infección primaria y puede ser reactivado por muchos factores, como traumatismos, estrés, exposición al sol, procesos que cursen con fiebre asociada, procedimientos quirúrgicos, entre otros. Una vez activado, se traslada a través del nervio trigémino hacia la córnea y causa la infección recurrente, la cual produce cicatrización corneal. Clínicamente, la membrana amniótica usada como sustituto de la membrana basal ha sido aplicada satisfactoriamente para el manejo de defectos epiteliales persistentes con o sin ulceración. Además, se ha descrito que el trasplante de membrana amniótica de múltiples capas es útil para el tratamiento de úlceras corneales profundas, descemetoceles y perforaciones corneales pequeñas. El presente reporte describe un caso de queratitis por herpes simple tratado con membrana amniótica con el que se obtuvo una agudeza visual buena y ausencia de queratitis recurrente durante dos años

Herpes simplex keratitis is one of the leading causes of infectious corneal blindness in the world. It remains latent in the human host after the primary infection and can be reactivated by many factors. When activated, it travels along the trigeminal nerve to the cornea, and causes recurrent infection which leads to corneal scarring. Clinically, preserved AM used as a basement membrane substitute has been applied successfully for the management of persistent epithelial defects with and without ulcerations. Furthermore, multilayered AMT has been described to be useful for the treatment of deep corneal ulcers, descemetoceles, and small corneal perforations. This report describes a case of herpes simplex keratitis treated by amniotic membrane transplantation that resulted in high visual acuity and the absence of keratitis recurrent during two years

Using amniotic membrane for anal sphincter repair in animal model / Uso de membrana amniótica para reparo de esfíncter anal em modelo animal

Purpose: Sphincter repair is the primary management for fecal incontinence especially in traumatic causes. Regardless of progression in the method and material of sphincter repair, the results are still disappointing. This study evaluates the efficacy of using amniotic membrane during sphincteroplasty regarding its effects in healing of various tissues. Methods: Rabbits undergone sphincterotomy and after three weeks end to end sphincteroplasty was done. Animals divided to three groups: classic sphincteroplasty, sphincteroplasty with fresh amniotic membrane and sphincteroplasty with decellularized amniotic membrane. Three weeks after sphincteroplasty animals were sacrificed and sphincter complex was sent for histopathologic evaluation. Sphincter muscle diameter and composition of sphincter was evaluated. Before sphincterotomy, before and after sphincteroplasty electromyography of sphincter at the site of repair were recorded. Results: No statistical significant difference was seen between groups even in histopathology or electromyography. Conclusion: Although amniotic showed promising effects in the healing of different tissue in animal and human studies it was not effective in healing of injured sphincter.

Objetivo: Reparo do esfíncter é o tratamento primário para casos de incontinência fecal, especialmente em causas traumáticas. Independentemente da progressão no método e do material de reparo do esfíncter, os resultados são ainda desapontadores. Esse estudo avalia a eficácia do uso da membrana amniótica durante a esfincteroplastia, com relação aos seus efeitos na cura de diversos tecidos. Métodos: Coelhos foram submetidos a um procedimento de esfincterotomia e, depois de transcorridas três semanas, foi realizada uma esfincteroplastia término-terminal. Os animais foram divididos em três grupos: esfincteroplastia clássica, esfincteroplastia com membrana amniótica fresca, e esfincteroplastia com membrana amniótica descelularizada. Três semanas após a realização da esfincteroplastia, os animais foram sacrificados e o complexo esfinctérico foi encaminhado para avaliação histopatológica. O diâmetro do músculo esfinctérico e a composição do esfíncter foram avaliados. Antes da esfincterotomia, e antes e depois da esfincteroplastia, foi registrada a eletromiografia do esfíncter no local do reparo. Resultados: Não foi observada diferença estatisticamente significativa entre os grupos, mesmo na histopatologia, ou na eletromiografia. Conclusão: Embora a membrana amniótica tenha demonstrado efeitos promissores em termos da cicatrização dos diferentes tecidos em estudos com animais e em humanos, não foi observada eficácia na cura do esfíncter lesionado.

Molten metal-related ocular thermal burn: report on two cases / Queimadura térmica ocular por metal derretido: relato de dois casos

ABSTRACT We report two cases of severe thermal burns on the ocular surface and its adnexal appendages that developed secondary to exposure to molten heavy metal with a melting temperature of near-thousand degree Celsius. Despite aggressive intervention and strict monitoring, the profound inflammation caused significant damage to the ocular surface, ending up in an intractable infection with an unfavorable outcome. The heat of the molten metal at impact, the heat-retaining capacity of the heavy metal, the total area of the ocular surface exposed to the molten metal, and the duration of exposure determined the severity of the injury. The unfavorable outcome, despite an intensive treatment, in terms of visual acuity and cosmetic appearance, should be explicitly explained to the patient, and a psychiatrist consultation should be considered if necessary.

RESUMO Relatamos dois casos de queimaduras graves da superfície ocular e seus anexos causadas por exposição à metais pesados derretidos com temperatura de fusão de quase mil graus Celsius. Embora rigorosamente acompanhados, a inflamação intensa causou danos significativos para a superfície ocular, que acabou em uma infecção intratável com um resultado desfavorável. O calor do metal fundido no momento do impacto, a capacidade de retenção de calor do metal pesado, a área total da superfície ocular exposta ao metal fundido e a duração da exposição determinaram a gravidade da lesão que vai ocorrer. O resultado desfavorável, apesar do tratamento intensivo, em relação à acuidade visual e à aparência estética, devem ser claramente explicados ao paciente e uma consulta ao psiquiatra deve ser considerada, se necessário.

Usos de membrana amniótica en patología ocular pediátrica / Use of amniotic membrane in childhood ocular disease

Introducción: La membrana amniótica (MA) posee varias propiedades clínicas que la hacen útil en el tratamiento de diferentes patologías. El principal efecto clínico es que permite la epitelización de los tejidos, favorece el crecimiento, adhesión y diferenciación de las células epiteliales, además de prevenir su apoptosis, reduciendo la cicatrización. Objetivo: Describir la utilidad de la membrana amniótica como alternativa en el tratamiento de la superficie ocular. Son abordados tópicos como las diferentes formas de obtención, preparación y conservación de la misma, así como sus mecanismos de acción y aplicaciones. Resultados: En el Servicio de Oftalmología del Hospital de Pediatría J. P. Garrahan se usaron 429 membranas amnióticas en 294 pacientes desde el año 2002 hasta octubre 2014 para el tratamiento de distintas patologías oculares. Los pacientes estudiados presentaron reducción de la inflamación, vascularización y mejor cicatrización. Conclusión: la MA es en la actualidad una alternativa en el tratamiento de patologías de difícil manejo que no responden a las terapias médicas convencionales. Sin embargo, su empleo deberá ser racional, para evitar falsas expectativas de considerarla como panacea en toda patología corneal o conjuntival (AU)

Introduction: Amniotic membrane has several clinical properties rendering it useful in different pathologies. Its main clinical effect is the epithelization of tissue, favoring growth, adhesion and differentiation of epithelial cells as well as prevention of apoptosis and reduction of scarring. Objective: To determine the usefulness of amniotic membrane as an alternative for ocular surface treatment. Issues such harvesting techniques, preparation, and storage of the amniotic membrane, as well as mechanisms of action and use are discussed. Results: At the Department of Ophthalmology of the Pediatric Hospital J. P. Garrahan 429 amniotic membranes were used in 294 patients between 2002 and October 2014 for the treatment of different eye pathologies. The patients studied presented with reduced inflammation and better vascularisation and scarring. Conclusion: Amniotic membrane is currently a treatment option in difficult-to-treat pathologies that do not respond to conventional therapies. Nevertheless, it should be used rationally to avoid unrealistic expectations considering it the panacea for all corneal or conjunctival pathologies (AU)

Use of the amniotic membrane to cover the peritoneal cavity in the reconstruction of the abdominal wall with polypropylene mesh in rats / Uso da membrana amniótica como cobertura da cavidade abdominal na reconstrução da parede com tela de polipropileno em ratos

OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of the amniotic membrane used with polypropylene mesh against the formation of adhesions and its influence on healing. METHODS: twenty five female Wistar rats were anesthetized for creating a parietal defect in the anterior abdominal wall. Its correction was made with polypropylene mesh alone and associated with amniotic membrane. In the control group (n=11), the screen was inserted alone. In group A (n=7) we interposed the amniotic membrane between the screen and the abdominal wall. In group B, the amniotic membrane was placed on the mesh, covering it. After seven days, the animals were euthanized for macroscopic and microscopic evaluation of healing. RESULTS: adhesions were observed in all animals except one in the control group. Severe inflammation was observed in all animals in groups A and B and in three of the control group, with significant difference between them (A and B with p=0.01). Pronounced angiogenic activity was noted in one animal in the control group, six in group A and four in group B, with a significant difference between the control group and group A (p=0.002) and group B (p=0.05). The scar collagen was predominantly mature, except in five animals of the control group, with significant difference between the control group and group A (p=0.05) and group B (p=0.05). CONCLUSION: The amniotic membrane did not alter the formation of adhesions in the first postoperative week. There were also pronounced inflammation, high angiogenic activity and predominance of mature collagen fibers, regardless of the anatomical plane that it was inserted in.

OBJETIVO: Avaliar a eficácia da membrana amniótica usada com tela de polipropileno contra a formação de aderências e sua influência na cicatrização. MÉTODOS: vinte e cinco ratas Wistar foram anestesiadas para criação de um defeito parietal na parede abdominal anterior. Sua correção foi feita com tela de polipropileno isolada e associada à membrana amniótica. No grupo Controle (n=11), a tela foi inserida isoladamente intra abdominal. No grupo A (n=7), interpôs-se a membrana amniótica entre a tela e a parede abdominal. No grupo B, a membrana amniótica foi colocada sobre a tela, recobrindo-a. Após sete dias, os animais foram eutanasiados para avaliação macroscópica e microscópica da cicatrização. RESULTADOS: aderências foram observadas em todos os animais, exceto em um do grupo Controle. Inflamação acentuada foi observada em todos os animais dos grupos A e B e em três do grupo Controle, com diferença significativa entre eles (A e B com p=0,01). Acentuada atividade angiogênica foi notada em um animal do grupo Controle, seis do grupo A e quatro do grupo B, com diferença significativa entre o grupo Controle e os grupos A (p=0,002) e B (p=0,05). O colágeno cicatricial foi predominantemente maduro, exceto em cinco animais do grupo Controle, com diferença significativa entre o grupo Controle e os grupos A (p=0,05) e B (p=0,05). CONCLUSÃO: a presença da membrana amniótica não alterou a formação de aderências na primeira semana de pós-operatório. Associou-se à inflamação acentuada, elevada atividade angiogênica e predomínio de fibras colágenas maduras, independente do plano anatômico em que foi inserida.

Autoinjerto limboconjuntival con membrana amniótica en la insuficiencia límbica total unilateral / Limbal-conjunctival autograft with amniotic membrane to treat total unilateral limbal stem cell deficiency

Se presentan tres ojos de tres pacientes con insuficiencia límbica total por quemadura alcalina grave (n= 2), con enfermedad de Coats y antecedentes de cirugía de desprendimiento de retina (n= 1). Los casos uno y dos tenían una evolución de las quemaduras de 2 años y 8 meses respectivamente, y el caso tres de 8 meses. A todos los pacientes se les realizó la misma técnica quirúrgica: peritomía a 360º, extirpación de la membrana corneal fibrovascular, autoinjerto limboconjuntival (donante del ojo homólogo sano) y la implantación de membrana amniótica. El caso 1, con agudeza visual corregida preoperatoria de percepción de luz y sentido cromático en el ojo derecho, alcanzó a los 12 meses una agudeza visual corregida de 0,3 y a los 13 años, con +1,50-0,50 x 90º, una visión de 0,9. El caso 2, con agudeza visual preoperatoria de bultos a 20 centímetros, logró a los dos años una agudeza visual de 0,6; y el caso 3, con visión preoperatoria de percepción de luz, alcanzó una visión de 0,05 (20/500). En todos los casos el autoinjerto limbo-conjuntival del ojo homólogo sano con implantación de membrana amniótica constituyó una excelente alternativa para la mejoría visual y la rehabilitación laboral de los dos primeros pacientes. En el caso uno se logró un resultado extraordinario. El caso 3 logró una reepitelización corneal total y una evidente mejoría de la transparencia corneal, pero por la enfermedad de base la agudeza visual solo mejoró discretamente.

Three eyes of three patients with grave alkali burns (n-2) and with Coats disease after retinal detachment surgery (n-1). All of the cases presented a total limbal stem cells deficiency. Cases 1 and 2 had an burning evolution of 2 years and 8 months respectively, and the case 3 an evolution of 8 months before surgery. All patients underwent the same operation: Peritomy 360º, keratectomy of corneal fibrovascular membrane, limbo-conjuntival autograft from the healthy fellow eye and implantation of amniotic membrane. Case number 1 with preoperatory visual acuity of light perception and projection improved to 0,3 his visual acuity after 12 months and with +1,50-0,50 x 90 a visual acuity 0,9 after 12 years. Case 2 with preoperatory visual acuity of counter finger at 20 centimeters improved his visual acuity 0,6 after two years, and case 3 with preoperatory visual acuity of light perception improved to 0,05 (20/500). In all cases, limbal-conjunctival autograft of the healthy fellow eye with amniotic membrane transplantation resulted an excellent option for improving visual acuity and laborer rehabilitation in cases 1 and 2 (achieving case 1 excellent visual acuity). Case 3 had a total corneal epithelization and an evident improvement in corneal transparency, but visual acuity had a little improvement due to base disease.